Bagaimana para ilmuwan mengisolasi DNA untuk mempelajarinya?

Menjawab:

Ada beberapa langkah untuk melakukan ini, tolong abaikan bahasa Inggris saya yang buruk, saya harap Anda masih bisa memahami prosesnya.

Penjelasan:

Ini tidak sesulit yang Anda kira.

Katakanlah kita ingin mengisolasi DNA dari calym thymus, Anda harus mengikuti instruksi ini (mereka sama untuk sebuah apel sejauh yang saya tahu, tetapi ada sedikit variasi):

1. Ambil 3 buah 3 gram dan potong kecil-kecil, sekecil mungkin.

2. Masukkan ke dalam blender, dengan 75 mL Saline-sodium citrate (SSC) per potong dan pastikan bilah blender tercakup sepenuhnya dalam SSC, jadi tambahkan sepotong thymus jika perlu.

   SSC memastikan membran sel dilarutkan.

   Terus blending sampai semuanya lancar.

3. Masukkan ke dalam tabung untuk centrifuge dan tarik dengan tabung lain agar centrifuge tidak pecah

4. Tempatkan tabung di centrifuge selama 20 menit pada 5.000 rpm

5. Ketika Anda mengeluarkan tabung dari centrifuge, Anda akan melihat memegang dua komponen. Bagian bawah memiliki zat padat, ini disebut pelet dan ini memegang inti sel dengan DNA. Anda juga akan melihat zat cair, yang disebut supernatan dan ini terdiri dari SSC dengan membran sel terlarut.

6. Tuang supernatan dalam satu gerakan cairan, ini disebut decanting dan ini meninggalkan Anda dengan pelet.

7. Masukkan sedikit 2,2 M NaCl dalam tabung dengan pelet, sehingga pelet hanya tercakup dalam NaCl. NaCl menyebabkan protein yang mengelilingi DNA mengendap.

8. Aduk dengan tabung reaksi kosong atau batang pengaduk. Akhirnya Anda harus mendapatkan dua komponen. Protein di bagian bawah dan cairan kental di atasnya.

9. Keluarkan cairan kental dengan pipet dan pastikan Anda tidak mengambil protein apa pun dengan cairan kental. (potongan protein yang sangat kecil sangat sulit untuk dihindari, tetapi cobalah untuk menghindari protein sebanyak mungkin)

10. Masukkan cairan kental yang Anda pipetkan dalam gelas kimia dan tambahkan etanol 2x lebih banyak. Tetapi tambahkan etanol dengan lembut karena Anda tidak ingin mencampurnya dengan DNA. Pada antarmuka antara etanol dan cairan kental Anda akan melihat gelembung DNA muncul.

11. Aduk perlahan dengan batang gelas, DNA bermuatan negatif sehingga harus menempel pada batang.

12. Masukkan ke dalam tabung reaksi dan larutkan dengan SSC.

Sebuah mesin khusus kemudian dapat memberi tahu Anda berapa banyak DNA yang telah Anda isolasi dan seberapa murni itu.