Menjawab:
Western blot (protein immunoblot) adalah teknik analisis yang digunakan secara luas yang digunakan untuk mendeteksi protein spesifik dalam sampel homogenat jaringan atau ekstrak.
Penjelasan:
Elemen kunci yang diperlukan untuk menyelesaikan tugas ini adalah:
- pemisahan campuran protein berdasarkan ukuran menggunakan elektroforesis gel.
- transfer efisien protein yang dipisahkan ke pendukung yang solid.
- deteksi spesifik protein target oleh antibodi yang hampir cocok.
Kemampuan western blots untuk secara jelas menunjukkan keberadaan protein tertentu, baik berdasarkan ukuran dan melalui pengikatan antibodi membuatnya sangat cocok untuk mengevaluasi tingkat ekspresi protein dalam sel untuk memantau fraksi selama pemurnian protein.
Dalam banyak kasus western blots digunakan dalam kombinasi dengan teknik deteksi berbasis antibodi kunci lainnya, seperti ELISA atau kimia imunohisto.
Apa itu tes HIV western blot?
Assay-linked immunosorbent assay (ELISA), juga dikenal sebagai enzyme immunoassay (EIA). Serangkaian pemeriksaan darah dilakukan untuk menguji HIV. Uji immunosorbent terkait-enzim (ELISA), juga dikenal sebagai enzim immunoassay (EIA), Ini adalah tes pertama yang akan diperintahkan oleh penyedia layanan kesehatan Anda untuk skrining untuk HIV. ELISA, seperti tes Western blot, mendeteksi antibodi HIV dalam darah Anda.
Apa yang mungkin menjadi masalah jika band tidak muncul di Western Blot?
Banyak ... Ada banyak alasan mengapa band mungkin tidak muncul di western blot. Apakah kombinasi sampel dan antibodi berhasil di masa lalu? Berikut adalah beberapa yang dapat saya pikirkan saat ini yang dapat menyebabkan pita tidak muncul: Apakah protein dipindahkan dari gel? Cobalah pewarnaan selaput dengan sesuatu seperti ponceau S atau amido hitam untuk melihat apakah ada band. Terkadang, Anda dapat melihat pita protein pada membran dengan membasahi dan memegangnya pada sudut ke cahaya. Apakah antibodi primer berfungsi? Ini adalah tes yang sulit dan satu-satunya cara Anda bisa adalah dengan memasukkan kontrol positif di
Mengapa GAPDH digunakan di Western Blot? + Contoh
GAPDH sering digunakan sebagai kontrol pemuatan. Di Western blotting kita sering menggunakan GAPDH sebagai kontrol pemuatan. Artinya, dengan memeriksa GAPDH kita dapat memeriksa bahwa kita memiliki jumlah protein setara yang dimuat pada jalur yang berbeda pada blot. Contoh penggunaan - katakanlah kita memiliki penyakit yang kita pikir menyebabkan peningkatan protein tertentu dalam sel. Kami akan membuat sampel dari sel "sehat" dan sampel lain dari sel "sakit". Kami kemudian akan memuat jumlah protein yang setara dari kedua sampel ke dalam gel untuk Western blot. Setelah memeriksa noda untuk protein yang